（西安）為了從白癜風(fēng)患者外周血B淋巴細(xì)胞中擴(kuò)增獲得原始親本配對(duì)的抗體基因。研究者以正常人的黑素細(xì)胞為抗原，用活細(xì)胞ELISA法篩選50例白癜風(fēng)血清，選擇其中7例抗黑素細(xì)胞膜抗體強(qiáng)陽性的患者外周血分離得到CD19+B淋巴細(xì)胞，以10%甲醛溶液固定，蛋白酶K溶液通透化處理，進(jìn)行in-cell PCR。用特異性引物進(jìn)行in-cell RT-PCR擴(kuò)增人免疫球蛋白輕鏈和重鏈可變區(qū)基因，采用Cre/loxP系統(tǒng)在細(xì)胞內(nèi)完成輕重鏈的連接，然后經(jīng)巢式PCR擴(kuò)增獲得具有細(xì)胞內(nèi)原始親本配對(duì)特性的單鏈抗體基因。結(jié)果經(jīng)in-cell PCR擴(kuò)增，獲得了與預(yù)期單鏈抗體大小一致的單一800 bp產(chǎn)物。可見利用in-cell PCR技術(shù)可以擴(kuò)增白癜風(fēng)原始親本配對(duì)的自身抗體基因。/**/