（成都）為了研究應(yīng)用載體介導(dǎo)的RNA干涉技術(shù)特異性干擾Raf-1基因在鼻咽癌細(xì)胞株HNE1中的表達(dá)以及對(duì)其生物學(xué)行為的影響。研究者 構(gòu)建利用U6啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄功能的shRNA的載體，在U6啟動(dòng)子下游分別插入含針對(duì)Raf-1基因不同位點(diǎn)的特異性RNA干擾序列-67 bp寡核苷酸片段，并編號(hào)命名為：pshuttle-Raf-1-a(225)，pshattle-Raf-1-b(358)和pshuttle-Raf-1-c(474)。將構(gòu)建的質(zhì)粒通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染人鼻咽癌細(xì)胞株HNE1，用 RT-PCR分析Raf-1基因的mRNA的表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染后HNE1細(xì)胞的凋亡率。結(jié)果 3種含有針對(duì)Raf-1基因不同特異性序列的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后均能干擾該基因在HNE1細(xì)胞中的表達(dá)，其中以pSIREN shuttle-Raf-1-b(358)作用最為明顯。RT-PCR檢測(cè)Raf-1基因mRNA表達(dá)量下降，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率增加，達(dá)到65%?？梢?應(yīng)用載體介導(dǎo)的RNAi技術(shù)可特異性干擾Raf-1基因在鼻咽癌細(xì)胞HNE1中的表達(dá)，使該細(xì)胞凋亡率增加，Raf-1基因相對(duì)應(yīng)的mRNA表達(dá)下降。 /**/