VEGF shRNA表達(dá)質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可高效抑制RB細(xì)胞中VEGF的表達(dá)，靶向VEGF的RNA干擾可作為拮抗VEGF并治療RB的有效手段。 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤是嬰幼兒最常見的眼內(nèi)惡性腫瘤，有遺傳型和不遺傳型，愈后極差。 中華眼科雜志6月第6期刊登一項(xiàng)研究，研究者構(gòu)建VEGF shRNA表達(dá)質(zhì)粒p4．1CMV―VEGF shRNA，以脂質(zhì)體介導(dǎo)其轉(zhuǎn)染兩種RB細(xì)胞系SO―RB50和HXO―RB44，新霉素篩選結(jié)合梯度稀釋法獲得p4．1CMV―VEGF shRNA陽性RB細(xì)胞單克隆，繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增建立p4．1CMV―VEGF shRNA陽性RB細(xì)胞，用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法檢測RB細(xì)胞中VEGF基因的表達(dá)，并用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測RB細(xì)胞上清中VEGF蛋白的表達(dá)；以與哺乳動物基因組無同源性的shRNA表達(dá)質(zhì)粒p4．1CMV―Neg shRNA作為陰性對照，同時(shí)以未做任何處理組作為空白對照。探討血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）短發(fā)夾RNA（shRNA）表達(dá)質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（RB）細(xì)胞中VEGF表達(dá)的作用。

    上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院眼科賈仁兵等研究人員研究顯示成功構(gòu)建p4．1CMV―VEGF shRNA并獲得其表達(dá)陽性的RB細(xì)胞克隆。陰性對照組和空白對照組SO-RB50細(xì)胞的VEGF基因表達(dá)量分別為實(shí)驗(yàn)組的5．02倍和6．32倍；陰性對照組和空白對照組HXO―RB44細(xì)胞分別為實(shí)驗(yàn)組的5．70倍和4．86倍。實(shí)驗(yàn)組SO―RB50細(xì)胞上清中，VEGF蛋白濃度為（187．69±83．89）μg/L，顯著低于陰性對照組（822．98±187．98）μg/L和空白對照組（865．76±170．33）μg／L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P〈0．01）；實(shí)驗(yàn)組HXO―RB44細(xì)胞上清中，VEGF蛋白濃度為（162．20±66．33）μg／L，與陰性對照組（764．33±164．79）μg／L和空白對照組（828．22±145．94）μg／L比較，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P〈0．01）。 因此可見VEGF shRNA表達(dá)質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可高效抑制RB細(xì)胞中VEGF的表達(dá)，靶向VEGF的RNA干擾可作為拮抗VEGF并治療RB的有效手段。