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由胚胎干細(xì)胞分化的心肌細(xì)胞移植對心肌梗死大鼠左心室重構(gòu)及心功

【?2008-05-26 發(fā)布?】 臨床報(bào)道  

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    該項(xiàng)研究目的是探討小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)分化的心肌細(xì)胞移植對SD大鼠心肌梗死后左心室重構(gòu)及心功能的影響。方法采用懸滴-懸浮培養(yǎng)法誘導(dǎo)ES分化形成擬胚體。其中包含有大量心肌細(xì)胞。將雄性SD大鼠冠狀動脈左前降支結(jié)扎。制成急性心肌梗死模型。1周后再次開胸。實(shí)驗(yàn)組于梗死區(qū)域注入心肌細(xì)胞懸液150μl(含細(xì)胞5×10^5個(gè)),梗死對照組于梗死區(qū)域注入等體積細(xì)胞培養(yǎng)液,另設(shè)假手術(shù)組,不結(jié)扎冠狀動脈。心肌梗死后1周和細(xì)胞移植后4周,采用超聲心動圖評價(jià)大鼠左心室形態(tài)和功能,用免疫熒光技術(shù)檢測移植細(xì)胞的存活及其表型。結(jié)果免疫熒光技術(shù)檢測到分化的心肌細(xì)胞表達(dá)特異性轉(zhuǎn)錄因子α輔肌動蛋白、α肌球蛋白重鏈和肌鈣蛋白1;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測到有心肌特異性轉(zhuǎn)錄因子Nkx-2.5、GATA-4及α肌球蛋白重鏈基因的表達(dá);膜片鉗記錄顯示所得到的分化的心肌細(xì)胞包括竇房結(jié)樣起搏細(xì)胞、心房樣細(xì)胞和心室樣細(xì)胞。細(xì)胞移植后4周。與梗死對照組相比,實(shí)驗(yàn)組左心室收縮末期容積和舒張末期容積均顯著縮小,左心室前壁舒張末期厚度明顯增加(P〈0.01)。左室長軸縮短率顯著升高(P〈0.01)。心臟組織冰凍切片可見4,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚標(biāo)記的呈藍(lán)色熒光的移植細(xì)胞核。移植細(xì)胞表達(dá)肌鈣蛋白I,移植細(xì)胞與受者的心肌細(xì)胞間有連接蛋白-43的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組中有2只(12.5%。2/16)出現(xiàn)了心臟畸胎瘤。所以得出結(jié)論由胚胎干細(xì)胞分化的心肌細(xì)胞移植可逆轉(zhuǎn)心肌梗死大鼠左心室重構(gòu)。改善左心室功能。/**/
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