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脂多糖對間充質(zhì)干細(xì)胞Toll樣受體4基因的表達(dá)水平及活性的影

【?2008-08-30 發(fā)布?】 臨床報道  

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    該項(xiàng)研究目的是探討脂多糖(LPS)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)Toll樣受體4(TLR-4)基因的表達(dá)及其功能的影響。

    方法采用貼壁培養(yǎng)和密度梯度離心法從大鼠骨髓分離MSC,通過細(xì)胞形態(tài)、成骨分化潛能及流式細(xì)胞術(shù)檢測表型以鑒定其純度;半定量RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測MSC在不同濃度(1、10、100μg/ml)LPS存在條件下培養(yǎng)24h的TLR-4mRNA相對表達(dá)量和共刺激分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ)的表達(dá)水平;ELISA法定量檢測TNF-α的分泌水平。

    結(jié)果骨髓MSC低表達(dá)TLR-4mRNA(相對表達(dá)量0.61±0.10),同時表達(dá)CD80[(9.56±0.69)%]、CD86[(22.03±2.03)%]、MHC-Ⅱ[(2.51±0.97)%],少量分泌TNF-α[(4.97±2.98)pg/ml]。MSC經(jīng)LPS處理后,其TLR-4mRNA、共刺激分子表達(dá)和TNF-α分泌水平均升高,其中10μg/ml LPS培養(yǎng)組升高顯著,TLR-4mRNA相對表達(dá)水平為1.55±0.02;CD80、CD86、MHC-Ⅱ陽性細(xì)胞率分別為(41.70±2.92)%、(59.72±2.00)%、(24.56±2.19)%;TNF-α分泌水平為(213.12±69.08)pg/ml,與對照組比較,P值均〈0.01。100μg/ml LPS處理組與10μg/ml LPS處理組相比,各項(xiàng)檢測指標(biāo)均降低,但MHC-Ⅱ和TNF-α的降低水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〉0.05)。

    由此得出結(jié)論骨髓MSC低表達(dá)TLR-4,體外LPS可促進(jìn)骨髓MSCTLR-4的表達(dá),且與濃度相關(guān)。伴隨TLR-4表達(dá)水平的升高,CD80、CD86、MHC-Ⅱ表達(dá)水平及TNF-α水平同時升高。

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