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低氧環(huán)境影響小鼠未成熟關(guān)節(jié)透明軟骨細(xì)胞培養(yǎng)

【?2008-12-06 發(fā)布?】 臨床報道  

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    中國研究者研究了低氧和低氧模擬化合物氯化鈷對小鼠未成熟關(guān)節(jié)透明軟骨細(xì)胞氧感應(yīng)基因和細(xì)胞表型的影響。研究者將經(jīng)酶消化分離出小鼠未成熟關(guān)節(jié)透明軟骨細(xì)胞,分別在21%氧、2%氧和150μmol/L氯化鈷條件下培養(yǎng)一定時間。通過倒置顯微鏡、透射電鏡和掃描電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。應(yīng)用定量PCR和Western Blot檢測葡萄糖轉(zhuǎn)運體-1(GLUT-1)、葡萄糖轉(zhuǎn)運體-3(GLUT-3)、磷酸果糖激酶-1(PGK-1)和低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF―1α)的表達(dá)。應(yīng)用定量PCR觀察軟骨細(xì)胞表型改變。應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽法(MTT)檢測低氧及氯化鈷對軟骨細(xì)胞活性的影響。用葡萄糖檢測試劑盒測葡萄糖攝取量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同培養(yǎng)條件下軟骨細(xì)胞形態(tài)無明顯差異。2%氧和氯化鈷可增加GLUT-1、GLUT-3及PGK-1mRNA表達(dá)。2%氧和氯化鈷可促進(jìn)GLUT-1、GLUT-3和HIF―1α蛋白表達(dá)。低氧和氯化鈷促進(jìn)細(xì)胞活性,增加葡萄糖攝取并促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成。由此,研究者得出結(jié)論,軟骨細(xì)胞能通過調(diào)節(jié)氧感應(yīng)基因適應(yīng)低氧環(huán)境,HIF―1α可能起關(guān)鍵作用。低氧能在一定程度上增加軟骨細(xì)胞活性和細(xì)胞外基質(zhì)合成。模擬體內(nèi)氧環(huán)境培養(yǎng)細(xì)胞能更好地了解軟骨細(xì)胞特性。/**/
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