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參照鏈介導的構象分析策略在HLA-B位點分型中的臨床應用研究

【?2005-11-27 發布?】 臨床報道  

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      (北京)為了建立并穩定HLA-B位點的參照鏈介導的構象分析(RSCA)系統,并鑒定RSCA分型策略的優勢,研究者提取27例造血干細胞移植患者及63名供者的外周血DNA,采用RSCA進行HLA-B位點分型,并與序列特異性引物聚合酶鏈反應技術(PCR-SSP)分型結果進行比較,對于疑難標本采用測序鑒定。結果在90份標本中,87份(96.7%)可明確判定結果,其中有1份標本與PCR-SSP結果不一致,經測序鑒定RSCA結果正確;67份(74.4%)可直接指定等位基因型別。此外,1份標本(1.1%)因PCR擴增結果太弱而未能獲得RSCA分型結果,2份標本只能確定1條等位基因,經測序發現另1條等位基因為已知等位基因,但RSCA數據庫中沒有其數據。隨機選擇20份標本進行RSCA重復性實驗,重復率為100%。在PCR-SSP方法分型中,約有10%的標本需要重復1~3次方能判定結果。可見RSCA具有靈敏、特異、分辨率高、重復性好、可發現變異基因及新的等位基因、大規模和低成本等優點,適用于大規模的無關移植供、受者的選擇。/**/
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