上海創(chuàng)建大規(guī)模細胞DNA轉(zhuǎn)染技術平臺

【?2005-08-11 發(fā)布?】　美迪醫(yī)訊

上海交通大學腫瘤研究所等單位的科研人員經(jīng)過多年攻關，創(chuàng)建了大規(guī)模細胞DNA轉(zhuǎn)染技術平臺，通過該平臺可直接篩出具有影響細胞生長、腫瘤發(fā)生發(fā)展相關基因，具有重要的潛在的應用與開發(fā)價值。該研究日前獲得2004年上海市科技進步一等獎。

該研究項目為上海市科委發(fā)展基金重點項目，由上海交通大學腫瘤研究所、上海市腫瘤研究所癌基因及相關基因國家重點實驗室和中科院上海生命科學院上海生物工程研究中心的顧健人院士、楊勝利院士、萬大方研究員及龔毅研究員等共同完成。該研究創(chuàng)建了大規(guī)模細胞DNA轉(zhuǎn)染技術平臺，以人胎盤、胎兒及肝組織cDNA文庫為材料，以人肝癌細胞SMMC－7721及小鼠NIH／3T3成纖維細胞為對象，以促進和抑制細胞克隆形成率及細胞灶形成率為指標，在基因組水平克隆篩選出對細胞生長有促進／抑制作用的基因，然后測序，進行生物信息學分析，最后確定其屬性，同時建立了各種細胞芯片的技術平臺。

研究中，在人胎盤、胎兒及肝組織三種cDNA文庫鋪板共15萬個cDNA克隆，應用自行設計的"自身雜交"的負篩選技術，挑選出相對低豐度的克隆3萬個，分別對肝癌細胞進行了29910個cDNA轉(zhuǎn)染，對NIH／3T3細胞進行了22926個cDNA轉(zhuǎn)染，共選出對細胞具有促進或抑制生長作用的基因3814個（8251個克隆），其中2836個（6958個克隆）屬已知基因，372個（384個克隆）為新基因，待確定的序列598個（895個克隆）。

據(jù)悉，對具有促進或抑制細胞生長功能的372個新基因和新技術平臺，已申請48項，至今已獲國家34項（256個基因）。獲得具有血清學診斷前景的候選基因兩個、藥靶候選基因兩個、促進血管新生基因1個、基因治療用候選基因3個。

本文關鍵字: 細胞DNA

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