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柔肝中藥對(duì)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞增殖能力及關(guān)節(jié)軟骨低聚基質(zhì)蛋白分泌有影響

【?2009-06-23 發(fā)布?】 臨床報(bào)道  

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6月23日消息,中國研究者探討了柔肝中藥對(duì)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞增殖能力及關(guān)節(jié)軟骨低聚基質(zhì)蛋白(COMP)分泌的影響。

研究者采用分階段酶消化法體外培養(yǎng)兔軟骨細(xì)胞,以2×10^4/ml密度接種3代內(nèi)細(xì)胞,以Ⅱ型膠原的免疫組織化學(xué)研究鑒定細(xì)胞。給予家兔臨床等效劑量灌胃后,抽取含藥血清培養(yǎng)細(xì)胞,分別用5%、10%的柔肝方含藥血清(分給藥后1、3、5h3個(gè)時(shí)間點(diǎn))以及正常兔血清、小牛血清干預(yù)7d,采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTF)法觀察中藥含藥血清對(duì)體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞增殖的影響;體外培養(yǎng)人軟骨細(xì)胞,采用柔肝復(fù)方組及單味柔肝藥提取物直接添加體外培養(yǎng)體系3d,添加終濃度為10mg/ml。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)藥物對(duì)體外培養(yǎng)的人軟骨細(xì)胞COMP分泌的影響。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原的免疫組織化學(xué)染色后有陽性表現(xiàn),在對(duì)軟骨細(xì)胞增殖的影響方面,柔肝方含藥血清各組均優(yōu)于兔血清組和小牛血清組,其中含藥血清組的3h時(shí)間點(diǎn)總體優(yōu)于1h及5h時(shí)間點(diǎn)(P〈0.05);在對(duì)軟骨細(xì)胞上清COMP分泌方面,柔肝復(fù)方及單方提取物組均有促進(jìn)細(xì)胞分泌COMP的作用(P〈0.05),但兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〉0.05)。

由此,研究者得出結(jié)論,柔肝方中藥含藥血清可以促進(jìn)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞增殖;在藥物直接干預(yù)的條件下,柔肝復(fù)方及單方提取物可以促進(jìn)軟骨細(xì)胞分泌COMP。

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