（重慶）為了構(gòu)建綠色熒光蛋白(GFP)與嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SARS)冠狀病毒 N蛋白的融合表達載體pEGFP-C1-N以及針對SARS冠狀病毒 N基因的小發(fā)卡型shRNA表達載體pshRNA-N，觀察shRNA對SARS冠狀病毒 N基因復(fù)制和表達的影響，研究者將構(gòu)建成功的pEGFP-C1-N與psh RNA-N共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞，于轉(zhuǎn)染后24、48、72 h觀察GFP表達的強弱，采用Western Blot分別檢測GFP與N蛋白的表達，逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測N基因的mRNA。結(jié)果 pshRNA-N作用組綠色熒光強度明顯弱于未干擾組，Western Blot和逆轉(zhuǎn)錄PCR結(jié)果也證實pshRNA-N對N基因和N蛋白的表達有明顯抑制作用，而無關(guān)序列的shRNA無此作用?？梢娽槍ARS冠狀病毒 N基因的shRNA具有顯著和特異的抑制N蛋白表達的作用。 /**/