天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院呼吸科(300052)
通過(guò)建立間歇缺氧細(xì)胞模型, 測(cè)定不同缺氧模式下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)含量的變化,以進(jìn)一步探討細(xì)胞水平VEGF 在間歇缺氧相關(guān)心血管疾病中的作用。采用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞可傳代細(xì)胞株ECV304 細(xì)胞系,暴露于不同的缺氧/再氧合條件,采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA 法)測(cè)定培養(yǎng)基中VEGF 濃度,同步進(jìn)行蛋白質(zhì)定量(BCA)檢測(cè)以進(jìn)行校正。結(jié)果表明間歇缺氧組VEGF 濃度為(220.88±25.78)pg/100 mg 蛋白,與間歇正常氧組[(76.19±4.73)pg/100 mg 蛋白]及空白對(duì)照組[(83.75±19.17)pg/100 mg 蛋白]間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=113.19,P=0.00)。其間,間歇缺氧組顯著高于間歇正常氧組(t=13.37,P=0.00)及空白對(duì)照組(t=12.67,P=0.00),而間歇正常氧組及空白對(duì)照組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.70,P=0.50)。間歇缺氧60分鐘循環(huán)組 VEGF 濃度顯著高于間歇缺氧30 分鐘循環(huán)組[(94.35±4.33)pg/100 mg 蛋白],兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=11.85,P=0.00)。相同累加缺氧時(shí)間及程度的間歇缺氧組VEGF 濃度顯著高于持續(xù)缺氧組[(31.78±8.11)pg/100 mg 蛋白]兩者比較(t=17.14,P=0.00)。4 組不同再氧合時(shí)間的間歇缺氧組比較,隨再氧合時(shí)間的延長(zhǎng),VEGF 濃度呈增加趨勢(shì),但當(dāng)再氧合時(shí)間達(dá)到495 秒時(shí)VEGF濃度下降(F=42.76,P=0.00)。提示缺氧及再氧合過(guò)程均為VEGF 上調(diào)的重要原因,VEGF 在間歇缺氧并發(fā)心血管疾病中起重要作用。
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