該項(xiàng)研究目的是觀察大鼠肝細(xì)胞與睪丸支持細(xì)胞混合共微囊化對(duì)肝細(xì)胞生物學(xué)活性的支持作用。
采用的方法是利用微囊發(fā)生器制備含肝細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞及兩者混合細(xì)胞的微囊,根據(jù)微囊內(nèi)包裹細(xì)胞種類的不同,分為微囊化肝細(xì)胞組,微囊化睪丸支持細(xì)胞組,肝細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞分別微囊后共同培養(yǎng)組和肝細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞混合共微囊組。觀察囊內(nèi)細(xì)胞形態(tài),體外培養(yǎng)測(cè)定培養(yǎng)液中Alb與尿素分泌,判斷各組囊內(nèi)肝細(xì)胞活性和功能。樣本比較采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的多元方差分析。
結(jié)果體外培養(yǎng)96h時(shí),光學(xué)顯微鏡下見(jiàn)微囊呈球形,表面光滑,細(xì)胞均勻、散在分布于微囊內(nèi),囊內(nèi)肝細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞呈圓形,未貼壁。微囊化睪丸支持細(xì)胞組培養(yǎng)上清液中無(wú)法測(cè)及Alb與尿素。與微囊化肝細(xì)胞組相比,肝細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞分別微囊后共同培養(yǎng)組與肝細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞混合共微囊組肝細(xì)胞的存活時(shí)間延長(zhǎng),培養(yǎng)上清液中Alb(F=217.56,P〈0.01)和尿素(F=232.72,P〈0.01)明顯增加?;旌霞?xì)胞共微囊組于培養(yǎng)第7天Alb與尿素含量最高,分別為(2.80±0.11)g/L、(1.92±0.10)μmol/L,而其他兩組均于培養(yǎng)第3天Alb與尿素含量達(dá)到最高,分別為(2.48±0.08)g/L、(1.47±0.08)μmol/L和(2.27±0.10)g/L、(1.37±0.05)μmol/L。相對(duì)于混合細(xì)胞共微囊組,肝細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞分別微囊后共同培養(yǎng)組在培養(yǎng)中后期Alb、尿素含量下降趨勢(shì)明顯。
由此得出結(jié)論肝細(xì)胞與睪丸支持細(xì)胞混合共微囊化能明顯延長(zhǎng)囊內(nèi)肝細(xì)胞的壽命,維持肝細(xì)胞形態(tài)和功能。
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